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肝脏作为机体最为重要的代谢器官，炎症、毒性物质、肝脏感染（病毒、细菌、真菌、寄生虫等）都会导致肝脏损伤，影响机体的代谢活动。肝脏损伤后会发生自我修复，此过程伴随着纤维化的发生，病理性的肝脏纤维化是指肝脏在损伤后的修复过程中，胶原等细胞外基质的形成和降解平衡被破坏，导致肝脏内纤维组织过度积累。目前，中国是世界上的肝病大国。慢性肝病在其疾病进程中都会发生纤维化并朝着肝硬化、肝癌的方向发展，因此阻止肝脏纤维化，逆转纤维化是临床和药物科研过程中重要的一个选题。今天小虫跟大家分享一些肝脏纤维化的动物实验模型。
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一、四氯化碳诱导的肝脏纤维化模型（一）实验动物
8周龄，体重为±20g左右的SD大鼠
8周龄，体重为25±2g左右的C57Bl/6小鼠
（二）实验材料
CCl4、橄榄油（植物油）、注射器
（三）实验步骤
试剂配制：
大鼠：CCl4与橄榄油1:1比例混合均匀。
小鼠：CCl4与橄榄油1:7比例混合均匀
大鼠皮下、腹腔或口服给予配制好的造模剂，剂量为1-2ml/kg，每周2次，保证给药时间间隔一致，持续6-8周即可出现肝脏的纤维化症状。
病理变化位置：中心叶或门静脉区
PS：CCl4易挥发，最好配置当天使用。在进行正式试验之前最好进行一次预实验，验证所选的动物及造模时间是否符合预期。
二、二甲基亚硝胺诱导的肝纤维化模型（一）实验动物
8周龄，SD大鼠，体重±20g左右
（二）实验材料
DMN，生理盐水
（三）实验步骤
试剂配制：称量一定量的DNN，使用生理盐水按照10mg/kg的剂量进行配制。
3次/周腹腔注射，连续给药大于4周，检测相关肝脏损伤和纤维化指标以便判断纤维化是否发生。
病理变化位置：汇管区纤维化（中央门静脉区）
PS：给药方式理论上是每周给药三次，要根据实际动物状态，调整给药的频率，适当的减少或者增加，减少频率需增加给药时间，增加给药频率可适当减少给药时间，但一般都要持续4周。
三、胆汁淤积诱导的肝纤维化（一）实验动物
8周龄，SD大鼠，体重±20g左右
8周龄，体重为25±2g左右的C57Bl/6小鼠
（二）实验材料
麻醉剂，手术线，棉球（棉签）
（三）实验步骤
1.动物实验前禁食12h，
2.使用麻醉剂麻醉大鼠，腹腔开口1cm左右（剑突以下），使用棉球或者棉签将肝脏向上翻起，找到十二指肠，顺着十二指肠找到胆总管，
3.用手术线将胆总管结扎，近心端和远心端各结扎一次，中间剪断，关闭腹腔，假手术组仅分离出胆总管，不结扎。
4.4周左右即可检测相关纤维化指标。
病理变化位置：门静脉周围，小胆管增生区域胶原纤维形成增多。
（四）注意事项
1、手术无菌操作，动物注意保温
2、尽量缩短操作时间
3、手术操作后注意动物创口感染。
四、营养性肝纤维化高脂、高蛋白饮食是现代人的日常饮食习惯，也是导致肝纤维化的另一个重要原因。
（一）实验动物
-g左右的SD大鼠
（二）实验材料
高脂、高胆碱、低蛋白饲料
或低蛋白、低蛋氨酸、加乙硫氨酸饲料
（三）实验步骤
每周更换两次特种饲料，持续8周以上。
PS：此方法造模耗时长，成模率低，一般用于非酒精性脂肪肝病研究。
五、模型比较毒性物质（CCl4、DMN、TAA）诱导的肝纤维化模型在很多杂志的研究中都比较常见[1,2,3]，在肝脏系统疾病的顶级期刊Hepatology中则更加重注临床实际，胆汁淤积导致的纤维化模型报道更多[4,5]，相比较于科学研究，医药研发企业对于营养性肝纤维化模型的研究和应用更为深入，希望小虫分享的这些肝纤维化的造模过程能为各位带来一定的启发，也欢迎大家一起研究探讨哦！
参考文献
[1]ShresthaN,ChandL,HanMK,LeeSO,KimCY,JeongYJ.GlutamineinhibitsCCl4inducedliverfibrosisinmiceandTGF-β1mediatedepithelial-mesenchymaltransitioninmousehepatocytes.FoodChemToxicol.Jul;93:-37.doi:10./j.fct..04..EpubApr29.PMID:.
[2]HsuWH,LiaoSC,ChyanYJ,HuangKW,HsuSL,ChenYC,SiuML,ChangCC,ChungYS,HuangCF.GraptopetalumparaguayenseInhibitsLiverFibrosisbyBlockingTGF-βSignalingInVivoandInVitro.IntJMolSci.May27;20(10):.doi:10./ijms2010.PMID:;PMCID:PMC.
[3]ZhangXW,ZhouJC,PengD,HuaF,LiK,YuJJ,LvXX,CuiB,LiuSS,YuJM,WangF,JinCC,YangZN,ZhaoCX,HouXY,HuangB,HuZW.DisruptingtheTRIB3-SQSTM1interactionreducesliverfibrosisbyrestoringautophagyandsuppressingexosome-mediatedHSCactivation.Autophagy.May;16(5):-.doi:10./...EpubJul9.PMID:;PMCID:PMC.
[4]RohYS,ParkS,KimJW,LimCW,SekiE,KimB.Toll-likereceptor7-mediatedtypeIinterferonsignalingpreventscholestasis-andhepatotoxin-inducedliverfibrosis.Hepatology.Jul;60(1):-49.doi:10./hep..EpubMay27.PMID:;PMCID:PMC.
[5]PatsenkerE,PopovY,StickelF,SchneiderV,LedermannM,S?gesserH,NiedobitekG,GoodmanSL,SchuppanD.Pharmacologicalinhibitionofintegrinalphavbeta3aggravatesexperimentalliverfibrosisandsuppresseshepaticangiogenesis.Hepatology.9Nov;50(5):1-11.doi:10./hep..PMID:;PMCID:PMC.
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